一、试剂纯度与质量方面
1,试剂的纯度会对培养物生长与实验结果造成直接影响,举例来说,培养基中如酵母提取物、蛋白胨等营养成分需要达到生物试剂级,
防止杂质对微生物代谢造成干扰,或者导致细胞毒性等。如果操作人员使用分析纯或者化学纯试剂,也可能因有机物、重金属等杂质,
对培养物活性产生一定影响。
2.实验用试剂必须全部经过严格的灭菌处理,方法一般包括过滤除菌、高压蒸汽灭菌等,这主要是为了防止引入支原体或杂菌等污染物。
举例来说,如细胞因子、血清等生物制剂需要通过0.22μm 滤膜进行过滤处理,且培养基需要在 121℃的高压下灭菌 20 分钟。
3.为了确保试剂质量,实验用试剂还需要附带合格证书,并通过空白对照实验进行验证。举例来说,新批次的培养基需要先进行无菌测
试,在确认无污染后才能投入使用。
二、试剂兼容与稳定方面
1.试剂需要确保和培养箱环境兼容,比如试剂pH值就需要和培养条件相匹配。举例来说,哺乳动物的细胞培养一般会要求pH值为7.2至
7.4,选用碳酸氢钠缓冲液维持,防止因培养箱内二氧化碳浓度的波动引起pH剧烈变化。另外,部分如抗体、酶等试剂有着对温度敏感
的特点,操作人员需要注意防止直接暴露于培养箱高温环境,正确做法应在分装后于冷藏区密封存放,实验需要使用时再临时加入。
2.试剂在生化培养箱的温度与湿度条件下需要保持稳定,举例来说,如氨苄青霉素等抗生素在高温下容易出现降解的问题,操作人员需
要现配现用或者分装冷存,在使用时再加入培养基。
三、试剂安全与环保方面
1.如临床样本、病毒培养液等试剂因为涉及病原微生物,需要在生物安全柜中进行操作,防止发生泄漏对培养箱造成污染。另外,为了
避免交叉感染,培养箱内部需要定期使用如含氯消毒剂等专用消毒剂或者75%乙醇进行擦拭。部分如甲醛、二甲亚砜DMSO等有毒试剂,
操作人员在使用时需要佩戴好防护手套和护目镜,防止挥发气体可能对培养物与操作人员造成的危害。
2.废弃试剂需要按照危险废物的分类进行处理,尤其是一些含有放射性物质、重金属的试剂,严禁直接排入下水道危害环境。如含叠氮
钠的缓冲液还需要使用专用容器收集,然后交由专业机构进行处理。
四、试剂存储与使用方面
1.试剂在存储时需要严格遵照标签要求,比如干扰素等试剂需要低温保存,应单独存放在4℃冰箱;光敏染料、维生素等试剂需要避光,
应选用棕色瓶存放在培养箱暗仓。
2.试剂在进入生化培养箱前,其外包装应用75%乙醇进行擦拭,防止外部污染带入箱内。在操作时,需要使用无菌吸管或者移液器,防
止交叉污染。另外,试剂开启后应尽快使用,防止因长时间暴露在空气中可能导致的成分挥发或者污染等问题。
五、试剂管理与记录方面
1.试剂需要做好管理工作,标注名称、浓度、配制日期、保质期以及责任人等信息,并定期检查清理过期试剂。
2.在使用试剂时,需要记录好批号、用量、实验日期等信息,以便结果异常或者出现污染时和追溯原因。
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